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质粒反向pcr原理(反向pcr扩增质粒)

今日更新 2024-06-18 19:58:04
导读 设计一对引物,针对基因两端(覆盖酶切位点),在上游引物中酶切位点后的一段序列中添加一个碱基,扩增以后,酶切产物和空载体,再连接一遍...

设计一对引物,针对基因两端(覆盖酶切位点),在上游引物中酶切位点后的一段序列中添加一个碱基,扩增以后,酶切产物和空载体,再连接一遍,转化,小提拿去测序。

最好上游换另一个内切酶位点,这样方便双酶切检测,区别于原来的质粒。

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